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液相色譜柱的平衡和日常使用保養(yǎng)方法
點(diǎn)擊次數(shù):713 更新時(shí)間:2022-09-22 返回
液相色譜柱的平衡:
由工廠(chǎng)測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。一定確保分析樣品所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來(lái)平衡色譜柱,就會(huì)在處理問(wèn)題方面獲得較大的"補(bǔ)償",而且色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng)!
操作步驟:
a、平衡開(kāi)始時(shí)將流速緩慢地提高,用色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(xiàn)(緩沖鹽或離子對(duì)試劑流速如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)平衡)。
b、如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過(guò)渡"即每天分析開(kāi)始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。
液相色譜柱的日常使用保養(yǎng):
·使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度);
·注意色譜的pH范圍,大多數(shù)色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-8;
·避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化;
·使用HPLC級(jí)試劑,流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理;
·如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢將柱子沖洗干凈并保存在乙腈中;
·壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號(hào);
·確認(rèn)流動(dòng)相中緩沖鹽的溶解性;
·確認(rèn)樣品在流動(dòng)相中的溶解性;
·避免壓力的突變。